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小鼠惊厥模型的制作

 一、惊

物理、化学或精神性的刺激所引发的全身骨骼肌不自主的强烈收缩,常见于小儿高热、破伤风、癫痫大发作、子痫和中枢兴奋药中毒等。

二、惊厥模型的制备

1.物理方法

⑴ 电休克法:以强电流通过角膜电极或耳电极,对动物脑部进行短时间刺激,引起惊厥发作;

⑵ 听觉刺激

⑶ 光刺激

2.化学方法:应用大剂量的化学药物使动物中枢神经系统过度兴奋,常用的药物有硝酸士的宁,戊四唑,印防己毒素和氨基脲等。

三、常用的抗惊厥药

1.苯二氮卓类:如地西泮

为镇静催眠药,随剂量增大,相继出现抗焦虑、镇静催眠和抗惊厥作用;

2.巴比妥类:如苯巴比妥、异戊巴比妥、硫贲妥

属镇静催眠药,随剂量增大,相继出现镇静、催眠、抗惊厥和麻醉作用;

3.硫酸镁

i.v.具有抗惊厥作用,Mg2 可拮抗Ca2 的作用,抑制神经递质传递和骨骼肌收缩,从而使肌肉松弛,临床常用于妊娠子痫。

本实验所用抗惊厥药为戊巴比妥钠,其用量大于镇静催眠量,故给完药后小鼠可能睡着了。

四、具体实验

[实验目的]

1.学习制做动物惊厥模型及抗惊厥药的实验方法;

2.观察戊巴比妥钠对士的宁惊厥的保护作用;

3.学习X2检验。

[实验原理]

硝酸士的宁是脊髓抑制性神经元甘氨酸受体的拮抗剂,对脊髓有选择性兴奋作用。皮下注射可致小鼠全身强直性惊厥。戊巴比妥钠促进中枢GABA对GABAA受体的结合,产生超极化抑制性突触效应,从而具有抗惊厥作用。

[实验材料]

1. 动物:昆明种小白鼠(18~22g,♀♂兼用);

2. 器材:天平、鼠笼,注射器

3. 药品:① 0.5%戊巴比妥钠溶液

② 0.008%硝酸士的宁溶液

③ 生理盐水

[实验方法]

1. 每组取小鼠8只,称重,标记,按体重随机分为两组。实验组腹腔注射戊巴比妥钠0.1ml/10g),对照组腹腔注射等容量生理盐水;

2. 20分钟后依次给每只鼠皮下注射0.008%硝酸士的宁0.2ml/10g。观察30分钟,记录动物死亡数。

[实验结果]

全班结果汇总,进行X2检验。

[注意事项]

1. 剂量要准确,时间掌握好;

2. 给药后应保持室内安静,避免刺激实验动物。

质反应资料:将观察单位按属性或类型分组计数所得的资料,如死亡和生存,治愈和未愈,有效和无效等。

本实验结果观察指标为生存、死亡的数目,所以属质反应资料,统计学分析用X2检验。

四格表资料X2检验步骤:

1.建立假设;

2.计算X2值(公式见讲义P18);

3.查X2表;

4.判断结果。

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